基因擴增儀性能能滿足不同工作環(huán)境的多種需求。可用作以聚合酶鏈式反應為特征的、以檢測DNA/RNA為目的的各種病原體檢測及基因分析。基因擴增儀廣泛應用于分子生物學、醫(yī)學、食品工業(yè)、司法科學、生物技術(shù)、環(huán)境科學、微生物學、臨床診斷、流行病學、遺傳學、基因芯片、基因檢測、基因克隆、基因表達等領(lǐng)域。
基因擴增儀的工作原理：
1、基因擴增的基本要素
基因擴增的基本要素與DNA復制的基本要素是一致的。
①DNA模板：待拷貝的DNA稱為模板，它可以是雙鏈DNA也可是單鏈DNA，Z后擴增得到的產(chǎn)物是雙鏈狀態(tài)的。
?、谝铮菏荄NA復制的先鋒，就象結(jié)晶過程中的晶核，引導DNA的合成。在PCR擴增中一般使用合成的寡核苷酸作引物。
?、跠NA聚合酶(TaqDNA聚合酶)：是DNA復制的動力，在dNTP等底物存在時在引物的引導下沿著模板DNA合成互補的DNA鏈。
?、芫彌_液：提供DNA合成反應所需的pH，離子強度等環(huán)境。
?、?種單核苷酸：dNTP，提供DNA合成原料。
2、基因擴增儀原理
基因擴增儀是利用PCR技術(shù)對特定基因做體外的大量合成，用于以檢測DNA/RNA為目的的各種基因分析。
PCR反應一般設(shè)置20~40次循環(huán)，每一循環(huán)包括高溫變性、低溫退火、中溫延伸三步反應。每一循環(huán)的產(chǎn)物作為下一個循環(huán)的模板。PCR的擴增效率很高，如果循環(huán)次數(shù)是30次，那么新生DNA片段理論上達到230拷貝(約為109個分子)。PCR反應每個循環(huán)的三個基本反應步驟如下：
?、倌０錎NA的變性：模板DNA經(jīng)加熱至94℃左右一定時間后，使模板DNA雙鏈或經(jīng)PCR擴增形成的雙鏈DNA產(chǎn)物解離，使之成為單鏈，以便它與引物結(jié)合，為下輪反應作準備;
?、谀０錎NA與引物的退火(復性)：模板DNA經(jīng)加熱變性成單鏈后，溫度降至55℃左右，引物與模板DNA單鏈的互補序列配對結(jié)合;
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